western blot（wb）是實驗室中(zhōng)常見且(qiě)重(zhòng)要的一種分子生物學實(shí)驗方法

具(jù)體的實驗原理(lǐ)和實驗步驟在(zài)前幾期中已經(jīng)做了(le)詳細的介(jiè)紹，實驗步(bù)驟大(dà)緻分爲：蛋白提(tí)取(qǔ)、蛋白定量、sds-page電(diàn)泳、轉膜、封閉(bì)、一(yī)抗孵(fū)育、清(qīng)洗、二抗孵育(yù)、清(qīng)洗、蛋(dàn)白檢(jiǎn)測。步(bù)驟複雜(zá)，耗(hào)時長(zhǎng)，容易(yì)出現各種問題，尤其對于(yú)新手來說更是一個挑戰(zhàn)。爲了讓大家能夠将(jiāng)這個(gè)實驗做到完美(měi)，本期(qī)就簡單向大家總(zǒng)結歸納(nà)了wb實驗中(zhōng)常見(jiàn)的一些問(wèn)題，并(bìng)給出了(le)解決方案，目的是爲了讓大家了(le)解wb實(shí)驗中的注意點(diǎn)和規(guī)範操作的(de)必要性，同時也(yě)是方便(biàn)大家在(zài)出現問(wèn)題後能(néng)夠及(jí)時(shí)分析出(chū)原因(yīn)，調(diào)整實驗(yàn)方案，得到預期(qī)結果。          

我們将常(cháng)見問題總結歸(guī)納爲(wèi)背景高、條(tiáo)帶形狀異(yì)常、非(fēi)特異性條(tiáo)帶、沒有條帶或條帶(dài)弱4大類。

本期我(wǒ)們接着介紹非(fēi)特異(yì)性條帶、沒(méi)有條(tiáo)帶(dài)或條帶弱這兩種(zhǒng)常見問題(tí)。

一、非特異(yì)性條(tiáo)帶(dài)

二、沒有條(tiáo)帶或條帶(dài)弱

從上面(miàn)的問(wèn)題分(fèn)析可以看出在實驗過程(chéng)中會出現很多(duō)人爲操作(zuò)上(shàng)的(de)失誤，比如(rú)封閉時間、清(qīng)洗時間(jiān)、抗體(tǐ)孵育時間的控(kòng)制；抗(kàng)體孵育的溫(wēn)度(dù)條件(jiàn)；保持膜的(de)濕潤等。爲(wèi)了避免這(zhè)些人爲操作所(suǒ)導緻(zhì)實驗失敗(bài)的因(yīn)素，可以通(tōng)過使用我司研(yán)發的(de)一(yī)款(kuǎn)aw系列全自動(dòng)清洗工(gōng)作(zuò)站，從封閉到顯色之前都(dōu)可以在(zài)這台(tái)設備(bèi)中完成(chéng)，即可以(yǐ)控制時間(jiān)和溫(wēn)度，也(yě)大大節約(yuē)了人爲(wèi)參(cān)與(yǔ)的(de)時間，降低(dī)人爲(wèi)誤差，提高實驗(yàn)成功(gōng)率(lǜ)。

标簽：捷美（118） 産品(pǐn)（64） western blot（14） 實驗(yàn)（12）