細胞(bāo)培養是指從生物體取出組(zǔ)織，分離的原代細胞(bāo)或細胞系，在體(tǐ)外模拟體(tǐ)内生理環境（無菌，适宜溫度，PH值和一定營養條件）等特定的條(tiáo)件下培養，使之生存并生長。細胞培養是生命科學的基礎，目(mù)前細(xì)胞培養工作已廣泛應用(yòng)于生物學(xué)、醫學、新藥研發等各個領域。

這期主題主(zhǔ)要圍繞細胞培養(yǎng)，向大家簡單介紹細胞培養相關的一些内容，如細胞培養的具(jù)體流程、細胞培養所需的條件、細(xì)胞培養的注意事項及問題分析等。細胞(bāo)培養(yǎng)的具體流程主要(yào)分爲:細胞複蘇、細胞傳代、細胞凍存。

本期讓我們先來了解一下

——關于細胞複蘇的相關内容

一、什麽是細胞(bāo)複蘇？

細胞複蘇是将休眠的細(xì)胞重新活化,使之重新生長進(jìn)入細胞周(zhōu)期,進(jìn)而分裂産生子細胞(bāo)的過程。

二(èr)、細(xì)胞複蘇的實(shí)驗操作步驟

1、從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管，用冰盒将其轉(zhuǎn)移至細胞房，迅速将凍存(cún)管投(tóu)入到已經預熱的(de)水浴(yù)鍋中迅速解(jiě)凍，并不斷的搖動，使管中的液體迅(xùn)速融化。

2、約1-2min後凍存管内(nèi)液體完全溶解，取出用酒精棉球擦拭或酒精噴灑凍存管的外壁，再(zài)拿入超淨台内，用移(yí)液槍将細胞液轉移至含有5mL完全培養基的15mL離心(xīn)管中，1000rpm離心5min。

3、棄去上清，用(yòng)1mL完全培養基重懸細(xì)胞團塊，制備細胞懸液，然後将細胞懸液加進含有4mL完全培養基的(de)細(xì)胞培養瓶中，蓋上瓶蓋混勻。

4、将細胞培養瓶放入(rù)37℃、5%CO2培養箱中培養。

注意事項

1.細胞複蘇的原則(zé)爲(wèi)快速融化：必須将凍存在(zài)-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞(bāo)外凍存時的冰晶迅(xùn)速融化，避免冰(bīng)晶緩慢融化時(shí)進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。

2.水浴鍋一定要(yào)提前預熱到37℃。

3.一次性在水浴鍋内融(róng)化的凍存管不要太多(duō)，會導緻傳熱不佳(jiā)，延長融化時(shí)間，對細胞造成損害。

4.實驗過(guò)程中每次将物品拿進超淨台中前，一定(dìng)要向其噴灑75%酒精消(xiāo)毒，或用酒精棉(mián)球(qiú)擦拭，防止污染，實(shí)驗全(quán)程無菌操作。

5.對于某些細胞比較脆弱，完全培養基需要提前預熱後再使用。