動物(wù)細胞或組織離(lí)開體内(nèi)到(dào)體(tǐ)外(wài)進行培養(yǎng)時，需(xū)要爲其提供生(shēng)長所(suǒ)需(xū)的(de)各種(zhǒng)營養(yǎng)物質(zhì)以及(jí)爲了讓(ràng)細胞在(zài)體外能夠更好的生長(zhǎng)所(suǒ)需要(yào)的各(gè)種試劑。
細(xì)胞(bāo)培養中的常(cháng)用試劑
動物細(xì)胞或組織離開(kāi)體内到(dào)體外進(jìn)行培(péi)養時，需要(yào)爲其(qí)提(tí)供生長(zhǎng)所需的各種營(yíng)養物質以及爲(wèi)了讓(ràng)細胞在體(tǐ)外能(néng)夠更好的生長所需要的(de)各種(zhǒng)試劑(jì)。本期(qī)就簡單向大家(jiā)介紹一(yī)下細胞(bāo)在培(péi)養(yǎng)過程中(zhōng)所(suǒ)用到的一些(xiē)試劑成分(fèn)以(yǐ)及(jí)它們(men)的作用。
01 細胞培養基(jī)成分(fèn)
(1).基礎培養基
常(cháng)見的基礎培養(yǎng)基主要(yào)有(yǒu)mem，dmem，rpmi，主(zhǔ)要(yào)提供(gòng)包含葡萄(táo)糖、氨(ān)基酸、水、微量元(yuán)素，碳酸氫鈉等的緩沖體(tǐ)系。
● 谷(gǔ)氨酰胺
是(shì)細胞生長所必須的(de)必(bì)需氨基(jī)酸，參(cān)與蛋(dàn)白質(zhì)合成和核酸代(dài)謝。
● 酚紅指(zhǐ)示劑(jì)
一種常用(yòng)的酸(suān)堿指示(shì)劑(jì)，在酸(suān)性時(shí)顯黃(huáng)色，中(zhōng)性時顯(xiǎn)紅色，堿(jiǎn)性時爲紫色，酚(fēn)紅在培養基中(zhōng)作爲ph值的指示(shì)劑。
● 碳(tàn)酸鹽(yán)/ph緩沖(chòng)系統
一種生理(lǐ)ph緩沖系統，由于(yú)細胞(bāo)代謝過程中産酸，培(péi)養基中的hco3-會逐漸被(bèi)消耗掉，所以需及時(shí)補充co2才能維持ph維持(chí)在一定範(fàn)圍内。
(2).動物(wù)血清
在基礎培養基(jī)中(zhōng)加入2%-20%血(xuè)清成爲完(wán)全培(péi)養基，血清不僅(jǐn)可以(yǐ)爲細胞提(tí)供生(shēng)長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還含(hán)有(yǒu)生(shēng)長因(yīn)子、激(jī)素、微(wēi)量元素和(hé)離子等參(cān)與細(xì)胞(bāo)代(dài)謝的(de)重要(yào)成分。
(3).抗生(shēng)素
爲了防(fáng)止細(xì)胞在(zài)培養(yǎng)過程被污(wū)染(rǎn)，通常會(huì)向完(wán)全培養基(jī)中添加青(qīng)黴素(sù)-鏈黴素混合液(yè)，即雙抗，青(qīng)黴素主要對革蘭氏陽性菌有效，鏈(liàn)黴素對許多革(gé)蘭氏陰(yīn)性菌有(yǒu)效。
02 胰(yí)蛋白酶-edta
胰蛋白酶可使細(xì)胞間(jiān)的(de)蛋白質(zhì)水(shuǐ)解進而(ér)細胞(bāo)離散開，edta是一(yī)種化學螯合(hé)劑，毒(dú)性小(xiǎo)，對貼壁細(xì)胞有離散(sàn)作用，兩者聯合使用(yòng)，分散(sàn)細胞的效力更高，這一步(bù)被稱爲(wèi)消化細(xì)胞。對(duì)于不同細(xì)胞而(ér)言，對(duì)于胰(yí)酶使(shǐ)用時的溫度、時間(jiān)、濃度都有不同的要求(qiú)，消化不足，細胞不能被消(xiāo)化下(xià)來，消化過(guò)度會(huì)造成細胞損傷(shāng)。因培養基中的(de)血清(qīng)可(kě)以(yǐ)降低(dī)胰(yí)酶的活性，通(tōng)常使用完全(quán)培(péi)養基來終(zhōng)止細(xì)胞消化(huà)。
03 pbs緩沖液
pbs是磷酸(suān)緩沖鹽溶液，具有鹽平(píng)衡、可調整的适(shì)宜ph緩沖作(zuò)用，一(yī)般用來(lái)清(qīng)洗細(xì)胞，可維持(chí)細胞(bāo)滲(shèn)透(tòu)壓。
04 二甲基(jī)亞砜(dmso)
一種重要(yào)的滲透(tòu)型(xíng)細胞(bāo)保護劑，是細胞(bāo)凍存液中(zhōng)的重(zhòng)要成分(fèn)。細胞在(zài)凍存過(guò)程(chéng)中(zhōng)，dmso能快速穿透(tòu)細胞(bāo)膜進入細(xì)胞内(nèi)，降低(dī)冰(bīng)點、延緩凍存(cún)過程、提高(gāo)細胞(bāo)内離子濃(nóng)度，減少細(xì)胞内(nèi)冰晶的(de)形成，可(kě)減少細胞損傷。
05 支(zhī)原(yuán)體抑制劑(jì)
支原體污(wū)染在細胞(bāo)培養過程(chéng)中常見的一種(zhǒng)污染(rǎn)源，然而在(zài)污染初期可以(yǐ)使用(yòng)支(zhī)原體抑(yì)制劑來(lái)消除細胞液中的支原(yuán)體，使實驗(yàn)可以(yǐ)繼(jì)續進行下去(qù)。
06 台盼(pàn)藍染料
一(yī)種檢測細(xì)胞膜(mó)完整性(xìng)常(cháng)用的生物染色試劑。死細胞由于細胞膜的完整性(xìng)喪失，通透(tòu)性增加，細(xì)胞可被台(tái)盼藍染(rǎn)成藍色(sè)，而活(huó)細胞因爲(wèi)有完(wán)整地(dì)細胞膜，能(néng)夠排(pái)斥台(tái)盼藍進(jìn)入(rù)細胞内，因(yīn)此不(bú)會被(bèi)染色。在顯微鏡(jìng)下通(tōng)過細(xì)胞顔色可以(yǐ)辨别活死細胞，方(fāng)便活(huó)細胞(bāo)計數。
捷美(měi)jimei
細胞(bāo)培養不僅(jǐn)需要上述的(de)這(zhè)些試劑，還需要适宜的生長環(huán)境（溫(wēn)度、濕度、co2濃(nóng)度(dù)），我(wǒ)們一直緻(zhì)力于(yú)細胞培養(yǎng)設備的研(yán)發，工(gōng)藝成熟(shú)、設(shè)備參(cān)數穩定，歡迎咨(zī)詢！
