随着(zhe)生(shēng)物(wù)醫藥的飛(fēi)速發展(zhǎn)，哺(bǔ)乳動物細胞已(yǐ)被廣(guǎng)泛用于(yú)重組蛋白、疫(yì)苗、抗(kàng)癌試劑及其他(tā)臨床(chuáng)相關(guān)的藥(yào)物(wù)的(de)生産中。      

現(xiàn)有的哺乳動(dòng)物表達系統包括中國(guó)倉鼠卵巢（cho）細胞(bāo)，齧齒動物細胞系（Ｎso, bhk, sp2/0）和人類(lèi)細胞(bāo)系（Ｈek293細(xì)胞, per.c6, cap, 纖維瘤(liú)），其中(zhōng)cho細胞和Ｈek293細(xì)胞(bāo)占(zhàn)據重(zhòng)要地(dì)位。

本期主要簡(jiǎn)述hek293細(xì)胞的發展(zhǎn)及蛋白表達系(xì)統的(de)特(tè)點(diǎn)

1、hek293細胞(bāo)蛋白(bái)表(biǎo)達系統(tǒng)特點

（1）能在(zài)無血(xuè)清的(de)培養基中(zhōng)懸浮培養(yǎng)，穩定生長(zhǎng)，大規(guī)模表(biǎo)達；

（2）轉染效(xiào)率高；

（3）表達蛋白結構(gòu)最接近其(qí)在人體内(nèi)構象；

（4）在培(péi)養體系中能夠(gòu)快速增長，高密(mì)度培養。

2、hek293細(xì)胞(bāo)的(de)發展(zhǎn)

hek293細胞(bāo)來源(yuán)于人類胚胎腎細胞中(zhōng)。在(zài)人的(de)胚胎腎細胞中(zhōng)轉入(rù)人5型腺病毒dna片段，得(dé)到的(de)人胚(pēi)腎(shèn)細胞永生化(huà)細胞系即(jí)爲hek293細(xì)胞(bāo)。

293t細(xì)胞

hek293細(xì)胞中轉入sv40t-antigen基因(yīn)形成(chéng)的高轉衍生株(zhū)成(chéng)爲(wèi)293t細胞(bāo)。含sv40ori的(de)質粒(lì)能夠(gòu)在該細胞(bāo)系中(zhōng)顯著擴增，從而促進(jìn)表達(dá)載體的擴(kuò)增(zēng)，促(cù)進蛋白的(de)表(biǎo)達，因此被廣泛(fàn)應用于(yú)逆轉(zhuǎn)錄病(bìng)毒生(shēng)産、基因(yīn)表達和蛋白表(biǎo)達(dá)。在293t細(xì)胞中(zhōng)共轉染入pbnd和pzap質粒，獲(huò)得的(de)具有g418耐(nài)受(shòu)的細(xì)胞系即爲(wèi)293t/17細胞(bāo)系。該細胞(bāo)系具有高轉染(rǎn)性的(de)特點(diǎn)。轉入ebv基因(yīn)則形(xíng)成293t/17 sf細胞系，該細(xì)胞(bāo)系主要(yào)用于細(xì)胞的瞬時轉(zhuǎn)染及蛋白(bái)表達。

293h細胞(bāo)

将hek293細(xì)胞馴化後得到(dào)的能夠在(zài)無血清培(péi)養(yǎng)體系下(xià)快速(sù)生長、具有高轉染效率及(jí)高效蛋(dàn)白(bái)表達(dá)性能的細胞系。該細胞系具有較好的貼附性(xìng)，常用于噬菌斑檢測和蛋白的(de)表達。例如(rú)293e細胞(bāo)是在293-h細胞中插(chā)入ebna-1基因的(de)細胞系，該基(jī)因能夠(gòu)穩定表達(dá)ebv病毒(dú)的ebna1蛋白。含有ebv複(fú)制起點(diǎn)（orip）的重組表達(dá)質粒，能夠(gòu)在h293e細胞中複制(zhì)，并實(shí)現蛋白的(de)高效表達。而插(chā)入截短過後的(de)ebna-1基因得到(dào)293-6e細胞，該細胞(bāo)能夠在(zài)無血清培(péi)養基中高表達生産(chǎn)蛋白及病毒載(zǎi)體。

293f細胞(bāo)

能夠在(zài)無血清培(péi)養基(jī)中快速生長并(bìng)高效表達(dá)蛋白(bái)的野生(shēng)型293細胞(bāo)系。在(zài)293f細胞中轉(zhuǎn)染pcmvsport6tag.neo 質粒的得到(dào)293ft細胞，該細(xì)胞穩定表(biǎo)達(dá)sv40大(dà)t抗原(yuán)，并且促進最适病毒(dú)産(chǎn)物的産生(shēng)，可(kě)用(yòng)于(yú)高滴度慢(màn)病(bìng)毒載體(tǐ)的生産。當(dāng)flp-intmt-retm293細胞(bāo)轉染(rǎn)了ecotropic receptor質(zhì)粒和mappit(mammalian protein-protein interaction trap)報告質粒(lì)稱爲(wèi)293ftm細(xì)胞(bāo)，主要(yào)用于(yú)蛋白(bái)互作的篩(shāi)選。

293s細(xì)胞

被馴化(huà)成能夠(gòu)懸浮培(péi)養且(qiě)能夠耐受(shòu)低鈣離(lí)子(zǐ)培養(yǎng)條件的293細胞(bāo)系(xì)。在293s細胞轉(zhuǎn)染pcdna6/tr質(zhì)粒得(dé)到(dào)耐(nài)受蓖(bì)麻毒素的細胞系即爲293sg。該細胞(bāo)系可用于四環(huán)素誘導的蛋白表達研(yán)究以及同源(yuán)的n-糖基化(huà)蛋白的表達。293sggd細(xì)胞則是在293sg轉(zhuǎn)染(rǎn)pcdna3.1-zeo-stendot質粒(lì)得到(dào)的細胞，其主(zhǔ)要(yào)用于(yú)糖基(jī)化(huà)工程研(yán)究(jiū)。

細胞(bāo)培養搖(yáo)床是(shì)工業中細胞培(péi)養所(suǒ)必須(xū)的，細(xì)胞(bāo)生長的狀态(tài)不僅取決(jué)于細胞自(zì)身的(de)狀态、營養(yǎng)物質(zhì)的成分，外界的環境也(yě)是(shì)十分(fèn)的重要，如(rú)搖床的轉速(sù)，溫度，二(èr)氧化碳濃度等。

捷美(měi)jm | 搖床(chuáng)系列(liè)産品

觸(chù)摸(mō)屏疊加搖(yáo)床

針對傳(chuán)統機芯(xīn)的缺點(diǎn)，捷美(měi)自主研發(fā)了磁力驅(qū)動機芯，具有發熱量(liàng)低、運(yùn)行穩定、噪音低、更安全、更(gèng)清潔、更節能，可以在(zài)惡劣(liè)的環(huán)境下(xià)長時間工作（耐高溫、高濕(shī)、弱酸堿），且減少(shǎo)裝置對周圍環境溫度的幹擾(rǎo)及後期(qī)維護成(chéng)本低(dī)等優點。

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