細胞培養

細胞培養過程(chéng)中即使我們再小心翼翼，還是(shì)會在不經意間出現細胞污染的情況，導緻實驗無法(fǎ)繼(jì)續進行，可能是準備已久的實驗，一下子又回到了起點。本期就細胞污染的常見類型簡單向大家介紹(shào)一下。

實(shí)驗室細胞培養過程中(zhōng)的污染物主要有兩大類：化學污染和生物污染物。

一、化學污染

主要有培養基、PBS、血清和胰酶等試(shì)劑中的雜質，内(nèi)毒素，洗滌劑殘留等。因此許多試(shì)劑在使用前需要過濾，清洗的物品一定要用超純水多清洗(xǐ)幾次并高溫高壓滅菌後使用。

二、生物污染

01 細菌污染

主要有(yǒu)白色葡萄球菌，大腸杆菌，假單孢菌、枯草(cǎo)杆菌等；細胞被污染(rǎn)後培養基會很(hěn)快變黃變渾濁，在顯微鏡(jìng)下可觀察到細胞間有(yǒu)細小菌體移動，在數(shù)小(xiǎo)時内(nèi)會出現細胞脫落漂浮，培養液中呈細沙狀。這種污染通(tōng)常是操作(zuò)不規範或無菌措施不到位等引起的。

02 黴菌污染

常見的(de)有白念珠菌、酵母(mǔ)菌、黑曲黴、孢子菌等；細胞污染後可明顯觀察到呈現串珠狀的白色(sè)或黃色漂浮物，顯微鏡下(xià)可見絮狀交錯的菌絲或串(chuàn)珠狀的透明(míng)菌團(tuán)生長在細胞之間，污染速(sù)度(dù)較慢，培(péi)養基依舊清澈，後期會(huì)在細胞間出現很多清晰珊瑚(hú)狀物，逐(zhú)漸會長出黑色絲狀物。這種(zhǒng)污染通常也是操作不(bú)規範或無菌措施不(bú)到位等引(yǐn)起的。

03 支原體污染

細胞被支原體污(wū)染後，培養液可(kě)不(bú)發生渾(hún)濁，短期内細(xì)胞沒有明(míng)顯的病理變化，細微變化也可由于傳代、換液而被緩解，因此不易被發現(xiàn)。隻有(yǒu)當污染嚴重時才影響細胞增殖，甚至從(cóng)培養器皿(mǐn)脫落。支原體可以與宿主細胞(bāo)形成(chéng)一個共生關系，使污染不(bú)斷擴大。主要來源于是已感染支原體細胞之間的(de)交叉污染，支原體感染的血清和胰酶等。在情況較輕時可使用支(zhī)原體清除劑。

04 黑膠(jiāo)蟲污染

污染後培養液不會渾濁，在高倍鏡下可(kě)觀察到細胞間有黑色顆粒在原地進行“布朗運動”，像小蟲遊來(lái)遊去。随着污(wū)染加重，被污染的細胞生長緩慢，細胞狀态差，空泡化嚴重，甚至還可能導緻(zhì)細胞形态的改變。污染源(yuán)主要來自于血清，如果出現污染，更(gèng)換血清。

05 病毒污染

被污染的細(xì)胞不(bú)會産(chǎn)生形态變化及細胞病理現象，培養液清(qīng)澈不混濁，少部分病毒會造成細胞變圓、腫脹，脫落。病毒可能來源于血(xuè)清。

06 細(xì)胞交叉污染

在顯微鏡下可觀察到部分細(xì)胞形态與所(suǒ)培養的細(xì)胞形态有明顯差(chà)異(yì)，可能是兩(liǎng)種或兩種細胞(bāo)以上的實驗同時進行，操作不當，使(shǐ)實驗耗材、試劑等混用而易造成的污(wū)染。

細胞培養中每(měi)次出(chū)現污(wū)染，不僅要丢棄污染的細胞、檢查各種(zhǒng)試劑，還需(xū)要(yào)對培(péi)養箱進行徹底的殺菌消毒，我們緻力研(yán)發的(de)二氧化碳細胞培養箱配(pèi)備高(gāo)溫滅(miè)菌功能（可(kě)選(xuǎn)“濕熱滅菌(jun1)”），接近過(guò)度滅殺（1012）的(de)标準要求，歡迎咨詢。

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