随着生物醫藥的飛速發展，哺(bǔ)乳動物細胞已被廣泛用于重組蛋(dàn)白、疫苗、抗癌試劑及其他臨床(chuáng)相關的藥物的(de)生産中。      

現有的哺乳動物表達系統(tǒng)包括中國倉鼠卵巢（CHO）細胞，齧齒動物細胞系(xì)（ＮSO, BHK, SP2/0）和人類細胞系（ＨEK293細(xì)胞, PER.C6, CAP, 纖維瘤），其中(zhōng)CHO細胞(bāo)和ＨEK293細(xì)胞占據重要地位。

本期主要簡述HEK293細胞的發展及蛋白表達系統的特點

1、HEK293細胞蛋白表達系統特點

（1）能在無血清的培養基中懸浮培養，穩定生長，大規模表達；

（2）轉(zhuǎn)染效率高；

（3）表(biǎo)達(dá)蛋白結構最接近其在人體内構象；

（4）在培養體系中能夠快速增長，高密度培養。

2、HEK293細胞的發展

HEK293細胞來源于人類胚胎腎細胞中。在人的胚胎腎細胞中轉入(rù)人5型(xíng)腺病毒DNA片段，得到的人胚(pēi)腎細胞永生化細胞系即爲HEK293細胞。

293T細胞

HEK293細胞中轉入SV40T-antigen基(jī)因形成的(de)高(gāo)轉衍生株成爲(wèi)293T細胞。含SV40ori的質粒能夠在該細(xì)胞系中(zhōng)顯著擴增，從而促進(jìn)表達載體的擴增，促進蛋(dàn)白的表(biǎo)達，因此被廣泛應用于逆轉錄病毒生産、基因表達和(hé)蛋白表達。在293T細胞中共轉(zhuǎn)染入pBND和pZAP質粒，獲(huò)得的具有G418耐(nài)受的細胞系即爲(wèi)293T/17細胞系。該(gāi)細胞系具有高轉染性的特點。轉入EBV基因則形成293T/17 SF細胞系，該細(xì)胞系主要用于細胞的瞬時轉染及蛋白表達。

293H細胞(bāo)

将HEK293細胞馴化後得到的能夠在(zài)無血清培養體系下快速(sù)生長、具有高轉染效率及高效蛋(dàn)白(bái)表達性能的細胞系(xì)。該細胞系具有較好的貼附性，常用于噬菌斑檢測和蛋白的(de)表達。例(lì)如293E細胞是在293-H細胞中插入EBNA-1基因的細胞系，該基因能夠(gòu)穩定表達EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV複制起點（oriP）的重組表達(dá)質粒，能夠(gòu)在H293E細胞中複制，并實現蛋白的高效表達。而插入截短過後的EBNA-1基因得到293-6E細胞，該細胞能夠在無血清培(péi)養基中高表達(dá)生産蛋(dàn)白及病毒載體。

293F細胞

能夠在(zài)無血清(qīng)培養基中快速生長并高效(xiào)表達蛋白的野生型293細胞系(xì)。在293F細胞中轉染pCMVSPORT6TAg.Neo 質粒的得到293FT細胞，該細胞穩定表(biǎo)達SV40大T抗原，并(bìng)且促(cù)進最适病(bìng)毒産物的産(chǎn)生，可用于高滴(dī)度慢病毒載體的生産。當(dāng)Flp-InTMT-RETM293細胞轉染了ecotropic receptor質粒和MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)報告質粒稱爲293FTM細胞，主要用于(yú)蛋白互作的篩選。

293S細胞

被馴化成能夠懸浮培養且能夠耐受低鈣離子培養條件的293細胞系。在(zài)293S細胞轉染pcDNA6/TR質粒得到耐受蓖麻毒素的(de)細胞系即爲293SG。該(gāi)細胞系可用于四環素誘導的蛋白(bái)表達研究以及(jí)同源的N-糖基化(huà)蛋白的(de)表達。293SGGD細胞則是在293SG轉染pcDNA3.1-zeo-STendoT質粒得到(dào)的細胞，其主要用于(yú)糖基化工程研(yán)究。

細胞培養搖床是工業中細胞培(péi)養所必須的，細胞生長的狀态(tài)不僅取決于細胞自身的狀态、營養物質的(de)成分(fèn)，外界的環(huán)境也是十分(fèn)的重(zhòng)要，如搖床的轉(zhuǎn)速，溫度，二氧化碳濃度等。

捷美JM | 搖床系列産品

觸摸屏疊(dié)加搖床

針對傳(chuán)統機芯的缺點(diǎn)，捷美自主研發了磁力驅動機(jī)芯，具有發熱量(liàng)低、運行穩定、噪音低、更安全、更(gèng)清潔、更節能，可以在惡劣的環境下長時間工作（耐高溫、高濕、弱酸堿(jiǎn)），且減少裝置對周圍環境溫(wēn)度的(de)幹擾及後期維護成本低等優點。

高精度搖床系列産品可實現高精度溫度控制，溫控均勻度達±0.2℃（@37℃）；采用變頻制冷技術，控溫域更廣，達室(shì)溫以下20℃~60℃（最低4℃）；箱體采用高分子複合材料，一次成(chéng)型，大大減輕用戶樓闆承重。